PLASMODİUM VİVAX'IN LAKTAT DEHİDROGENAZ ENZİMİNİ KODLAYAN GENİN İFADE EDİLEREK İLGİLİ PROTEİNİN SAFLAŞTIRILMASI VE ANALİZLERİNİN YAPILMASI

Abstract

Sıtma etkeni olan Plasmodiumlar'ın mevcut antimalarial ilaçlara karşı dirençkazanmaları yeni ve etkili antimalarial ilaçların geliştirilmesini gerekli kılmıştır. Bu tezdePlasmaodium vivax'ın laktat dehidrogenaz enzimini kodlayan gen C terminaline 6 histidinamino asidi ilave edilerek çoğaltılmış ve pKK223-3 ifade vektörüne aktarılarak genin E. coli'deifadesi yapılmıştır. Üretilen bu protein Ni-NTA kit ve Ni-NTA agaroz kullanılaraksaflaştırılmış ve kinetik olarak analiz edilmiştir. PfLDH'ına karşı üretilen bir antikor, kinetikolarak analiz edilen saf PvLDH'ına karşı test edilmiştir ve sonuçta iki proteinin de oldukçabenzer olduğu ve PvLDH'ın PfLDH antikoru ile reaksiyon verdiği gözlenmiştir. Bu benzerliğedayanarak PfLDH enzimi üzerinde yeni antimalarial ilaç bulma yönünde yapılan çalışmaların,saf olarak elde edilen P. vivax LDH'ı kullanılarak da yapılabileceği ve benzer sonuçlar alınacağıümit edilmektedir. Sonuç olarak türlerden biri üzerinde etkili olacak olan bir ilacın geliştirilmesidurumunda aynı ilacın diğer türler üzerinde de etkili olabileceği beklenmektedir.Anahtar kelimeler: Sıtma, Plasmodium vivax, laktat dehidrogenaz, ifade, saflaştırma.