DENEYSEL İSKEMİ REPERFÜZYON HASARI OLUŞTURULMUŞ SIÇAN BEYİN DOKUSUNDA OTULIN VE SPEKSİN İMMUNREAKTİVİTESİNİN İNCELENMESİ

Abstract

İnme vasküler bir nedene bağlı olarak ortaya çıkan fokal serebral fonksiyon kaybı ile sonuçlanan akut klinik tablolara neden olan sendromdur. Klinik tablo oldukça değişkendir belirtiler günler içinde düzelebilecek kadar hafif olabileceği gibi ciddi sekel bırakan veya ölümle sonuçlanan klinik tablolarıda içerebilir. Toplumda en sık ölüm nedenleri arasın da ve sakatlığın ilk sırada gelen nedenidir. İnme patofizyolojisinde nöronların nekroz ve apoptozisi ile sonuçlanan nöroinflmasyon rol oynar. Nöroinflamasyonun mekanizması net anlaşılamamakla beraber OTULIN ve speksin moleküllerinin nöroinflamasyonda da rol aldığı ve seviyelerinin artığı düşünülmektedir. Akut iskemik inmenin erken döneminde aşırı enflamatuar yanıtın engellenmesi nöron hücrelerini koruyabilir ve nörolojik sonuçları iyileştirebilir Bu çalışmada deneysel iskemi-reperfüzyon hasarı oluşturulan sıçan beyin dokusunda OTULIN ve speksin serum düzeylerinin ve immünreaktivitesinin incelenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada 8-12 haftalık 35 adet Spraque-Dawley cinsi erişkin erkek sıçanlar rastgele 5 gruba ayrılacak şekilde kullanıldı. Kontrol grubu, Sham grubu, İ/R 2 saat grubu, İ/R 12 saat grubu, İ/R 24 saat grubu oluşturuldu. Kontrol grubundaki sıçanlara deney süresince herhangi bir işlem yapılmadı. Sham grubundaki sıçanlar servikal orta hattan insizyonla bilateral karotis kommunis arterler gözlendikten sonra kapatılıp 4. saatte dekapite edildi. İ/R 2 saat grubu, İ/R 12 saat grubu ve İ/R 24 saat grubundaki sıçanlar bilateral karotis kommunis arterler gözlendikten sonra internal karotis arter içinde cerrahi iplik ilerletilip orta serebral arter 120 dakika oklüde edildi. Ardından sırasıyla 2.saat 12.saat ve 24.saat boyunca reperfüzyonu sağlandı. Deney süresi sonunda tüm gruplardaki sıçanlar ketamin ve xylazine uygulanarak anestezi altında dekapite edildi. Dekapitasyonun ardından sıçanların dokuları hızla çıkarılıp uygun fiksatiflerle tespit edilip ardından histolojik takip serilerinden geçirilip parafin bloklara gömüldü. Parafin bloklardan alınan doku kesitlerinde OTULIN ve Speksin için immunohistokimyasal boyama ve apoptoz için TUNEL boyama yapıldı. Bununla birlikte alınan kanlar santrifüj edilerek ayrılan serumların ELİSA yöntemi ile OTULIN, SPEKSİN ve TOS düzeylerine bakıldı Çalışmamızda da kontrol, Sham, İR-2, İR-12 ve İR-24 gruplarında OTULIN ve speksin serum seviyeleri biyokimyasal olarak incelendiğinde kontrol, sham ve İR-2 grupları benzerdi. İR-12 ve İR-24 grupları kontrol grubuyla karşılaştırıldığında anlamlı şekilde arttığı tespit edildi, bununla birlikte İR-12 ile İR-24 grupları arasında anlamlı fark yoktu. OTULIN ve speksin immunreaktivitesini değerlendirmek için beyin dokusu immünohistokimyasal olarak boyandı. Kontrol, sham ve İR-2 grubunda benzer olarak saptandı. İR-12 ve İR-24 gruplarında, kontrol grubuyla karşılaştırıldığında OTULIN ve speksin immunreaktivitesi istatiksel olarak anlamlı derecede artmış olarak tespit edildi. İR-12 grubu ile İR-24 grubu arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark yoktu. Sonuç olarak; deneysel iskemi-reperfüzyon hasarının beyin dokusunda OTULIN ve speksin seviyelerini artırdığı, iskemi-reperfüzyonun beyin dokusunu hasarlanmasının patofizyolojisinde OTULIN ve speksinin önemli bir rol oynayabileceği düşünülmüştür. İskemik inmede OTULIN ve speksinin daha geniş çalışmaların yapılması ile inme patofizyolojisinin aydınlatılmasına ve hatta tedavi seçeneklerinin oluşturulmasına katkı sunulabileceği düşünülmüştür. Anahtar Kelimeler: Beyin, iskemi reperfüzyon hasarı, OTULIN, speksin